T4 GP44-62 Clamp loader protein試劑是來源于T4噬菌體基因組編碼的三大解旋酶之一，它為復(fù)制型解旋酶，

即解旋后可在DNA聚合酶（T4 gp43）的作用下引導(dǎo)DNA前導(dǎo)鏈的延伸。Gp41解旋酶屬于SF4解旋酶家族，

偏好5'-3'方向解旋；除解旋外， gp41還可與gp61 primase形成引發(fā)復(fù)合體引導(dǎo)滯后鏈的合成。

因此，gp41蛋白為DNA先導(dǎo)鏈和滯后鏈合成所必需，且這種gp41的這種特性在其loader gp59蛋白存在的情況下顯著增強(qiáng)。

Gp41是一種高進(jìn)行型解旋酶，在ssDNA上的傳送速率為~500nt/s，解旋dsDNA的速率為~250bp/s。

本制品為經(jīng)克隆后重組表達(dá)而得重組蛋白。

組分

組分名稱100 μg

T4 gp41 DNA helicase (0.5 μg/μl)100 μl

儲存

-20℃可保存3年。

T4 GP44-62 Clamp loader protein試劑恒溫擴(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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